第三篇 新版ISO 17511,，是修訂更是突破
新版ISO 17511有6種溯源模式（model calibration hierarchies for metrological traceablity），這一篇我將對(duì)這六種模式一一介紹,。
1,、模式1 完整的校準(zhǔn)等級(jí)和向SI的計(jì)量學(xué)溯源
這一類的測(cè)量項(xiàng)目有可用的一級(jí)參考測(cè)量程序和一級(jí)參考物質(zhì)，具有良好決定的組分,，如一些電解質(zhì),、代謝物、甾體激素和一些甲狀腺激素,，在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供的常規(guī)結(jié)果中,，這些項(xiàng)目占較大部分。
圖1 新版ISO 17511模式1與03版的對(duì)照
新版模式1（見圖1左）與03版模式1（見圖1右）無(wú)本質(zhì)區(qū)別,。我個(gè)人認(rèn)為新版增加了一些內(nèi)容,，首先，如圖1左紅框標(biāo)出的,，增加了p1和m1,，這是03版沒有的。增加的這一校準(zhǔn)等級(jí)序列是與我們的實(shí)際工作相符合的,，在溯源過程中,，大家獲得的是有證一級(jí)參考物質(zhì)（m1），這些有證一級(jí)參考物質(zhì)一般是純物質(zhì),，通常是國(guó)家計(jì)量部門研制的,，通過定量核磁法（qNMR）、質(zhì)量平衡法等方法（p1）對(duì)純度定值,。將m1通過重量法、計(jì)數(shù)法等方法（p2）配制獲得一級(jí)校準(zhǔn)物（m2）,。m2校準(zhǔn)一級(jí)參考測(cè)量程序（p3）,，下面與03版ISO 17511相同。m1到m2的這一步增加了不確定度,，所以這也是新版ISO 17511細(xì)化溯源鏈的原因,。其次，新版增加了一些項(xiàng)目,，例如血細(xì)胞計(jì)數(shù)（03版中是第三種模式）,、核酸拷貝數(shù)濃度、CD4細(xì)胞計(jì)數(shù),，也被納入了可以溯源的類別中,，基因測(cè)序法、流式細(xì)胞術(shù)（FCM）法,、數(shù)字聚合酶鏈反應(yīng)（dPCR）法,、顯微鏡鏡檢法都被列入了參考測(cè)量程序,，這些變化都是與技術(shù)的進(jìn)步分不開的。
2,、模式2 被測(cè)量由參考測(cè)量程序定義,，無(wú)一級(jí)參考物質(zhì)，能溯源到SI單位
這一類的測(cè)量項(xiàng)目是指酶催化活性濃度的溯源,。在03版中,，直接引用了模式1，其實(shí)是不太恰當(dāng)?shù)?。我一再?gòu)?qiáng)調(diào),，新版ISO 17511是實(shí)踐的總結(jié)、是技術(shù)的發(fā)展,。大家看新版模式2（見圖2）,，特別符合我們的實(shí)際工作情況。
在模式2,，我們要注意兩點(diǎn),，第一點(diǎn)是m1、m2,、p2不適用,，p1直接到了p3；第二點(diǎn)是標(biāo)準(zhǔn)中也提到某些凝血因子（例如VIII）的溯源也屬于這種情況,，而03版中是第3種模式,。
圖2 新版ISO 17511模式2
3、模式3 被測(cè)量由參考測(cè)量程序定義,，該參考測(cè)量程序由特定的一級(jí)校準(zhǔn)物校準(zhǔn),，能溯源到SI單位
這種情況是指參考測(cè)量程序檢測(cè)的量，這個(gè)量不是預(yù)期要測(cè)量的量的整個(gè)分子結(jié)構(gòu),，而是被測(cè)量的一個(gè)組分（例如一個(gè)肽段,、一個(gè)抗原表位），由于參考測(cè)量程序?qū)Ψ肿咏Y(jié)構(gòu),、抗原表位具有分析選擇性（以前叫分析特異性）,，因此被測(cè)量是由這個(gè)參考測(cè)量程序定義的。這一類項(xiàng)目包括糖化血紅蛋白（HbA1c）,。
在模式3,，我們要關(guān)注幾點(diǎn)，首先,，模式3與03版的模式2差別很大,，03版模式2也是舉例HbA1c的溯源模式，但是按照當(dāng)時(shí)的技術(shù)水平,，是屬于有國(guó)際約定參考測(cè)量程序（非一級(jí)）和國(guó)際約定校準(zhǔn)品,，不能溯源到SI單位,。10多年過去了，IFCC發(fā)展了高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜,、高效液相色譜串聯(lián)毛細(xì)管電泳的參考測(cè)量程序,，制備了HbA1c和HbA0的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，建立國(guó)際參考實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò),，這些工作推動(dòng)了HbA1c計(jì)量溯源的發(fā)展,。第2點(diǎn)要關(guān)注的是，猛一看溯源圖似乎與模式1一樣,，但實(shí)際是有差別的,，看圖3紅框標(biāo)示部分，模式3被測(cè)量是由p3定義的,，HbA1c被酶切成肽段,，高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜、高效液相色譜串聯(lián)毛細(xì)管電泳參考測(cè)量程序選擇性地測(cè)量HB糖化的N末端殘基,。
圖3 新版ISO 17511模式3
4,、模式4 被測(cè)量由國(guó)際賦值方案所定義，該方案給國(guó)際約定校準(zhǔn)物（符合ISO 15194）賦值,，不能溯源到SI單位
從模式4開始,，不能溯源到SI單位。符合該種情況的是使用WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測(cè)量項(xiàng)目,，如蛋白類激素,、某些抗體和腫瘤標(biāo)記物。
這種模式m1,、m2,、p1、p2都不適用,。新版模式4（圖4左）與03版模式4（圖4右）相似,，我不再詳細(xì)介紹。
圖4 新版ISO 17511模式4與03版的對(duì)照
5,、模式5 被測(cè)量由國(guó)際一致化方案定義，沒有有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),，不能溯源到 SI單位
模式5是新版ISO 17511增加的,，針對(duì)例如IFCC正在推動(dòng)的甲狀腺功能檢測(cè)的國(guó)際一致化方案。對(duì)于模式5,，ISO/TC 212同時(shí)發(fā)布了一個(gè)配套標(biāo)準(zhǔn)ISO 21151:2020《In vitro diagnostic medical devices — Requirements for international harmonisation protocols establishing metrological traceability of values assigned to calibrators and human samples》,。
關(guān)于這個(gè)全新的模式，由于內(nèi)容較多,，我會(huì)在本系列文章的結(jié)束一篇即第10篇專門介紹,。
圖5 新版ISO 17511模式5
6,、模式6 被測(cè)量由制造商內(nèi)部自定義的參考物質(zhì)定義，沒有一級(jí)參考物質(zhì)和有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),，也沒有參考測(cè)量程序和一致化方案,，不能溯源到 SI單位
模式6相當(dāng)于03版的模式5，溯源到制造商自行建立的標(biāo)準(zhǔn),，例如大分子的抗體,、腫瘤標(biāo)記物等。
模式6（圖6左）與03版（圖6右）雖然相似,，但是還是有差別,，比舊版多了m3，如圖6左紅框所示,，新版模式6溯源的終點(diǎn)在于制造商自定義的參考物質(zhì)（m3）,，被測(cè)量由這個(gè)參考物質(zhì)定義。m3通常是一些純品,，例如針對(duì)抗原檢測(cè),，m3往往是純化的重組抗原，采用重量法或免疫分析方法（p4,，制造商選定的測(cè)量程序）得到制造商工作校準(zhǔn)物,。下面的步驟兩個(gè)版本相同。我本人認(rèn)為這是符合我們IVD和臨床檢驗(yàn)的特點(diǎn)和實(shí)際情況的,，更合理,，在實(shí)踐中，對(duì)于這樣的量,，IVD制造商就是這么做的,。
圖6 新版ISO 17511模式4與03版的對(duì)照
新版ISO 17511就介紹到這兒，最后還想要表達(dá)：計(jì)量溯源性研究是復(fù)雜的,、系統(tǒng)的課題,，本人水平有限，來(lái)介紹這個(gè)難度較大的標(biāo)準(zhǔn),，滿心的誠(chéng)惶誠(chéng)恐,，但是我愿意“被拍磚”或者“被噴”，就是想著真理越辯越明,。再一次想對(duì)大家說(shuō)：希望大家多關(guān)注,、多學(xué)習(xí)ISO 17511。
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